細胞棚一般便是負責單抗、HIV、體細胞等醫(yī)治中藥制劑和診斷試劑、生產(chǎn)制造用細胞及牛血清等檢測的專用型試驗棚；并包含負責相對應種類國家藥品標準、一類藥物和進口藥品規(guī)范的技術性審批、核查、修定或擬定等；負責相對應種類國家國家標準物質的研發(fā)、校準和派發(fā)；進行相對應技術性方式科學研究及專業(yè)技術人員學習培訓。

病理科細胞棚關鍵服務于臨床醫(yī)學，為臨床醫(yī)生給予立即而確切的細胞學查驗結果，它根據(jù)微創(chuàng)或微創(chuàng)手術的方法，既緩解患者查驗時的痛楚又可以得到立即客觀性的結果。

 

一細胞棚如何設置

1)       基本細胞棚的設定和設備

1.        無菌技術細胞棚：

1)       由更衣室,緩沖間和操作室三部份構成

2)       更衣室：坐落于塑造棚最外界，用以拆換清潔的衣帽鞋防護口罩。置放消毒殺菌的防護衣、衣帽柜、鞋架。

3)       緩沖間：坐落于更衣室與操作室中間，目地是為了確保操作室的無菌檢測自然環(huán)境。置放家用冰箱、石蠟灌、消毒殺菌好的滅菌物件等。

4)       操作室：坐落于內部結構，專用型于無菌技術、細胞塑造。置放超凈工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱,離心脫水機,倒置顯微鏡等。

棚間規(guī)定：單獨棚間，按潔凈棚規(guī)定修建，并必須維持室內消毒和清理無塵室：

1)       紫外線滅菌燈―造成活性氧，而且棚里溫度及環(huán)境濕度均較高，不利工作員身心健康。

2)       空氣凈化的恒溫恒濕設備設備―－最好是，氣體潔凈度等級等級如下所示：

潔凈度等級等級	細顆粒物較大容許數(shù)／立方	微生物菌種較大容許數(shù)	浮游菌／立方	沉降菌／皿
100級	3500	0	5	1
10000級	350,000	2,000	100	3
100000級	3,500,000	20,000	500	10
300000級	10，500，000	60,000	1000	15

注：氣體潔凈度等級等級表：一般一般塑造棚常采用100000級的

2.        提前準備棚：常設定在無菌技術細胞棚外界，關鍵開展栽培基質及相關塑造用的液態(tài)等的制取。關鍵設定：離心脫水機、恒溫水浴鍋、按時時鐘、一般天平秤及日常剖析解決物

3.        刷洗消毒間：要和別的棚域分離，最好是單獨一棚，適用于各種各樣塑造容器的清理、提前準備和消毒殺菌，常設定：烘干箱、髙壓蒸汽消毒鍋、去離子水或是純凈水CPU、酸缸、不銹鋼水槽軟毛刷等。

二．細胞棚常見的基本上機器設備

1.儀器設備：

1)       凈化工作臺－常見側流式的（豎直流）操作臺，潔凈度等級應做到100級。中國商品一般都能夠合格。視場角地尺寸采用一個較寬的或是好幾個較小的，如：北京市嘉創(chuàng)博遠生產(chǎn)制造的VC-S-1040

2)       高倍顯微鏡：顛倒光學顯微鏡，若有標準，還行配備含有拍照系統(tǒng)軟件的高品質相差顯微鏡、解剖學高倍顯微鏡、錄影系統(tǒng)軟件或縮時影視拍攝設備等，便于隨時隨地觀查、紀錄、拍攝細胞生長發(fā)育狀況。需海外不錯商品，如：Olympus

3)       CO2培養(yǎng)箱：需國外產(chǎn)品，如：SANYO/三洋

4)       烘干箱：電熱干燥箱提溫較高，一般需做到160℃以上。中國商品可合格

5)       水提純設備：造成去離子水，可以用三蒸水取代。國外產(chǎn)品如：MillQ

6)       電冰箱：低溫冰箱（-20℃）可選中國的、超低溫冰箱（-70,80C,）必須國外產(chǎn)品

7)       液氮罐：中國商品可

8)       離心脫水機：中國商品可，低速離心機就可以，不用超低溫冷藏。用以細胞地基沉降，快速不太好。

9)       精密電子天平：國內就可以，需做到精度：電子分析天平的感量為0.1mg、0.01mg和0.001mg。

10)    消毒機：髙壓蒸汽消毒鍋，國內

11)    過濾裝置：用以過慮培養(yǎng)液，國內進口都可以

2.常見的塑造容器：

1)       塑造瓶：由夾層玻璃或塑膠做成。適用于塑造、繁育細胞。開展塑造時培養(yǎng)瓶瓶塞加蓋螺旋式瓶塞或橡膠塞子，膠塞多用以密封性塑造。國內塑造瓶的尺寸以容積（ml）表明，如250ml、100ml、25ml等；進口塑造瓶則多以底面積（cm2）表明。

2)       細胞培養(yǎng)皿：由夾層玻璃或塑膠做成，供盛取、分離出來、解決機構或做細胞毒副作用、集落產(chǎn)生、單細胞分離出來、放射性核素摻加、細胞繁育等試驗應用。常見的細胞培養(yǎng)皿規(guī)格型號有10cm、9cm、6cm、3.5cm等。

3)       多孔結構塑造板：為塑膠制品?？晒┘毎麖椭萍凹毎靖弊饔玫雀鞣N各樣檢驗試驗應用。其特點是節(jié)省樣版及實驗試劑，可一起檢測很多樣版，便于開展無菌技術。塑造板分成各種規(guī)格型號，常見的規(guī)格型號有：96孔、24孔、12孔、6孔、4孔等。

4)       塑造實際操作相關的容器：

a)        貯液瓶：適用于儲放或配置各種各樣塑造用液態(tài)如栽培基質、血清蛋白及實驗試劑等。貯液瓶分成多種差異規(guī)格型號，如1000ml、500ml、250ml、100ml、50ml、5ml等。

b)       塑料吸管：關鍵分成標尺塑料吸管、無標尺塑料吸管。標尺塑料吸管適用于汲取、遷移液態(tài)，常見的有1ml、2ml、5ml、10ml等規(guī)格型號。無標尺塑料吸管分成直頭塑料吸管及彎管塑料吸管，除可以作汲取、遷移液態(tài)外，彎管尖塑料吸管還常見于吹打、攪拌及傳代培養(yǎng)細胞。

c)        加樣器（移液器）：用以汲取、挪動液態(tài)或滴入樣版。可按照需求調整量的尺寸，吸量精確、便捷。尤以少量加樣器，可確保試驗試品（或實驗試劑）成分精準，可重復性優(yōu)良?，F(xiàn)階段，可高溫消毒的，多路的各種移液器可儲存者挑選，能保證加樣精確、迅速、便捷而且做到無菌檢測規(guī)定。

d)       別的用具：還有搜集細胞用的離心管架，置放實驗試劑或臨時性插置塑料吸管用的試管嬰兒，裝放塑料吸管便于消毒殺菌的鋼化玻璃或不銹鋼儲罐，用以儲放小物件培養(yǎng)物件有利于髙壓殺菌的鋁質便當盒或儲槽，套于塑料吸管頂端的塑膠吸塵器，封閉式各種各樣瓶、管的橡膠塞子、外蓋、凍存細胞用的安瓿或凍存管、不一樣尺寸的注射針、量杯和容量瓶及其布氏漏斗，凈化工作臺應用的酒精噴燈，供實驗人員操作之前消毒殺菌手應用的盛滿乙醇或別的消毒劑的小型噴水壺等。

三 細胞棚管理方法管理制度

細胞棚是開展各種各樣細胞塑造的凈化處理級實驗棚，全部進到實驗棚的人員都需要遵循實驗棚相關的管理制度，接納實驗棚管理方法人員的管理。

第一章 條例

第一條 細胞棚關鍵由團體內有關科學研究人員應用，正常情況下不擴大開放，別的人員如的確需應用細胞棚務必事先征求實驗棚負責人和細胞棚負責人允許。

第二條 出入細胞棚實驗必須嚴苛備案。若有不符實驗棚工作中和生物安全規(guī)定的，實驗棚負責人和細胞棚工作中人員有權利勒令整頓。

第三條 應用人員需參與專業(yè)的細胞棚應用標準學習培訓并通過培訓后，即可批準進到細胞棚開展實驗。禁止未經(jīng)同意許可私自進到細胞棚或應用有關機器設備。

第四條 細胞棚正常的應用全過程中，人員出入應根據(jù)緩沖間和風淋室間；出入實驗棚的儀器和試品需根據(jù)傳遞窗，禁止隨身攜帶帶入。實驗用具應盡可能一次帶入，禁止將與實驗不相干的物件帶入實驗棚，在細胞棚里不可開展微生物菌種等其他易污染物質的塑造，嚴禁從業(yè)一切高風險生物化學實驗。

第五條 實驗人員應愛惜實驗棚各種儀器設備，依照標準應用并維持設施清理。實驗中的價格昂貴機器設備，未經(jīng)同意許可不能私自電源開關。儀器儀表須經(jīng)專業(yè)學習培訓后才能實際操作未經(jīng)同意許可不可更改設備儀器的預置主要參數(shù)。設備儀器出現(xiàn)異?；虍a(chǎn)生安全事故，應立即向實驗棚負責人匯報，分配技術專業(yè)人員開展維修。

第二章 規(guī)章

第一條 基本實際操作

1. 衣著專用型實驗服。實驗人員務必在細胞棚緩沖間內拆換細胞棚專用型實驗服，禁止不穿實驗服或立即衣著一般實驗棚實驗服進到細胞棚。

2. 衣著專用型涼拖。在提前準備間換下來自身的鞋，盡量減少在緩沖間行走、滯留。

3. 細胞棚較多可6本人一起應用。

4. 實驗全過程中禁止喧鬧，閑談，不斷出入細胞棚。

第二條 培養(yǎng)箱應用標準

1. 從培養(yǎng)箱拿取物件前，用乙醇清理兩手（或膠手套），盡可能減少開門時間和降低打開門頻次。
　注： 培養(yǎng)箱中的氣體是通過過慮的清潔氣體。長期打開或經(jīng)常電源開關培養(yǎng)箱，非常容易導致環(huán)境污染。

2.從培養(yǎng)箱取放細胞時輕拿小心輕放，手疾眼快，順手關嚴培養(yǎng)箱門。沒經(jīng)容許，嚴禁翻閱、挪動別人細胞或試品，若有特別必須的，請聯(lián)絡實驗棚負責人融洽。

3. 塑造瓶皿放進培養(yǎng)箱前，用醫(yī)用酒精消毒表層，并稍等片刻至酒精揮發(fā)后再放進，以防塑造箱里停留太多乙酸乙酯蒸汽。
4. 塑造箱里細胞塑造的置放需干凈整潔井然有序，便捷搜索，與此同時應盡可能提升培養(yǎng)箱的運用高效率，承擔教師可視性實驗狀況開啟或終止空培養(yǎng)箱的應用，節(jié)約能源。
5. 一般塑造中的細胞，既非實驗獨特必須，一瓶/板細胞每日只必須觀查生長發(fā)育情況一次，2人以上同用的細胞，可約好時間一起觀查。
　注：經(jīng)常將細胞取出觀查，非常容易給培養(yǎng)箱導致環(huán)境污染，與此同時也會危害細胞生長發(fā)育情況的穩(wěn)定。

6.原代細胞需置放在原代培養(yǎng)專用型培養(yǎng)箱塑造，不可置放于別的培養(yǎng)箱，如一段時間內無原代細胞實驗，負責人可融洽分配培養(yǎng)箱供別的細胞塑造應用。

7.實驗人員應時常留意查驗培養(yǎng)箱溫度、CO2汽體量是不是相符合額定值。密切關注塑造箱里的加濕盤，按時拆換無菌水并做好消毒殺菌。密切關注塑造箱里狀況，如發(fā)生發(fā)霉、牙斑菌、衣原體和支原體感染或別的顯著染菌征兆，應該馬上通告管理人員以及它使用人。

第三條 顯微鏡使用標準

1. 顛倒相差顯微鏡應用前，用酒精棉從正中間至周邊擦洗測角儀。
2. 離去細胞棚時或長時間不需采用時，立即合上開關電源，增加電燈泡使用壽命。盡量減少經(jīng)常電源開關高倍顯微鏡開關電源。

3.一次細胞實驗應用結束后，在顯微鏡使用記錄冊上備案。

4.光學顯微鏡歸屬于珍貴儀器設備需遵循珍貴儀器設備預定應用技術規(guī)范。

第四條 潔凈臺有關實際操作標準

1. 潔凈臺應用遵循預定標準。在細胞棚入口預定，細胞棚里填好應用備案。

a：無預定者若必須在別人預定時間段內應用，先要征求預定者的允許，不然應沒有理由交出操作臺，以防耽擱別人實驗。

b：應用油性記號筆在預定報表上提早預定下一周的使用時間，一定要注意周六周日就是指上星期的禮拜天。

c：預定內容請包含：時間段，名字，如獨特實驗請注明。

2. 潔凈臺應用前要紫外線殺菌燈直射15分鐘殺菌，應用前、后要用酒精棉球擦洗工作中棚消毒殺菌，全部物件放進潔凈臺內應用前均應消毒殺菌，潔凈臺內禁止堆積太多物件危害風路均衡，不一樣潔凈臺內物件禁止經(jīng)?；Q應用。

3. 引燃酒精噴燈前需查驗瓶中乙醇是不是充足，液位應占瓶高1/3-2/3。
　注： 消毒殺菌用75%的乙醇，酒精噴燈用95%以上的乙醇，向噴水壺或燈內加上乙醇時請注意。

4. 潔凈臺中應放置廢水杯，用以臨時儲放廢料，實驗完畢后將杯里添加NaOH飽和溶液解決一會兒，廢水廢棄物倒進蓄水池并與此同時自來水沖釋，固態(tài)廢棄物倒進微生物試品專用型垃圾箱中
　注： 廢水缸應妥善處理，禁止長期置放，以防留出很多栽培基質滋長病菌。

5.細胞實驗后一切帶有細胞塑造廢棄物的塑造瓶，離心管架，容量瓶等務必立即帶出細胞棚。

第五條 器材的清理標準

1. 可回收利用的容量瓶、離心管架、塑造瓶皿等，放進配有冷水的塑料罐中泡浸，桶剛需有一定量的冷水以未過泡浸物件。
　注： 可回收利用容器必需時先基本洗刷后再放進桶內，尤其是塑造瓶或血清蛋白管內有很多高營養(yǎng)成分的液態(tài)殘余時，非常容易使桶內的冷水長菌。確保泡浸的瓶、管中徹底被冷水充斥著，而不是在配有很多氣體的情形下被碾過桶底?！　?

2. 冷水清洗后立即放進酸缸泡浸，應由操作者自己立即清理晾曬預留，實際操作時一定要注意帶膠皮手套，當心實際操作。
　注： 嚴禁長期泡浸于冷水中，這時病菌很有可能已在桶中成長并釋放出來類毒素。細菌內毒素難以利用基本濕熱滅菌流程除去整潔，即使干烤也無法保障其徹底失去活性。類毒素對細胞生長發(fā)育及多種多樣實驗均有很大危害。

清洗程序流程：冷水沖十次以上除去重金屬超標殘余，隨后沖去離子水5次，再用超純水系統(tǒng)5次，倒放置烘干箱中晾曬。并立即捆扎殺菌。

第六條 電冰箱、實驗試劑等有關實際操作標準

1. 從電冰箱拿取物件姿勢要快速，閉店時要查驗門是不是關好。按類型儲放實驗試劑。禁止長期打開電冰箱門。
2. 每個人儲放于電冰箱內的栽培基質、生化試劑、試品要標明名字、配置日期、試品名字，獨特實驗試劑需得到細胞棚管理方法人員允許之后才能置放。不可應用其他人的栽培基質或別的生化試劑。

3. 散裝好的血清蛋白長期儲存于-80℃，應用前放在4℃預解除凍結。正常情況下解除凍結好的血清蛋白應所有配出含血清蛋白的培養(yǎng)液預留，若有剩下，則儲存于4℃并盡早應用。最好不要應用別人開了的血清蛋白，以防交叉式環(huán)境污染。

4.細胞棚里的冰柜空間比較有限，盡可能僅置放應用次數(shù)較高的實驗試劑。切勿將一些閑置不用實驗試劑，環(huán)境污染實驗試劑長期性置放在細胞棚。

5.工作中人員會按時對電冰箱開展清除，發(fā)覺無標識，到期實驗試劑等違法物件將全部清除出來，而且搜索實驗試劑配備人給與警示。

第七條 進到細胞棚物件操縱

1. 全部進到細胞棚的物件需通過傳遞窗，盡可能通過紫外光直射，乙醇表層消毒殺菌。

2. 禁止將很有可能帶有污染物質或病菌的實驗物件帶入細胞棚。

3. 細胞棚里僅置放少許實驗務必耗品就可以，不可成箱住入，發(fā)生潔凈棚內物件沉積情況。

4. 細胞棚里存物柜的物件置放由有關管理方法人員分配，并做標識。

第八條 細胞棚清理準則

1.  每星期值日生時間從周六逐漸，至下周五完畢。
2. 日常維護保養(yǎng)：留意培養(yǎng)箱表明正常的，高倍顯微鏡，電冰箱，潔凈臺的常規(guī)應用與維護保養(yǎng)。細胞棚里及其大門口微生物試品專用型垃圾箱的立即清除。

3. 每星期大清理：每周五中午五點用新潔爾滅清掃細胞棚。

清理次序：擦潔凈臺（用酒精棉球）；用新潔爾滅擦桌面上，培養(yǎng)箱，潔凈臺及其電冰箱表面，及桌子的儀器設備，細胞棚墻壁，傳遞窗，風淋室棚；給恒溫水浴鍋放水或魚缸換水，細胞棚衣櫥和涼拖放置齊整，拖地板，紫外光消毒殺菌細胞棚30分鐘。

注：若上星期值日生立即給塑造箱里不銹鋼水槽加滿水，依據(jù)工作經(jīng)驗將來一周內培養(yǎng)箱不容易干水，但值日生仍應時常查驗，便于及時處理異常現(xiàn)象。謹記給培養(yǎng)箱加殺菌水。
4. 在沒有發(fā)生問題的情形下，每2個月清理一次培養(yǎng)箱：先將培養(yǎng)箱中的東西取下儲存于潔凈臺內，針對特別敏感的細胞可以儲存于另一個培養(yǎng)箱；將塑造箱里的不銹鋼板材取下，包含4塊橫版和上下2塊立著的鐵架子，用酒精棉球清理厚鋼板和培養(yǎng)箱內腔；運行培養(yǎng)箱自消程序流程。

第九條 人員學習培訓

1.由即將做細胞實驗的人員提交申請，填好細胞棚應用申請表格。

2.細胞棚承擔教師視申請辦理總數(shù)酌情考慮分配學習培訓時間，培訓計劃包含安全教育培訓、基礎知識與實踐活動實際操作學習培訓。

3.培訓考核達標后由老師、培訓老師、細胞棚負責人簽名確定授于其細胞棚應用管理權限。

4.學習培訓不及格再次參與學習培訓。

第十條 規(guī)章制度的執(zhí)行與懲罰

1.細胞棚負責人及其管理方法人員密切關注細胞棚的運用狀況，發(fā)覺違背規(guī)章制度作業(yè)者最先給與提示，但須做紀錄。

2.針對一周內違背3次之內者給予警示，3-5次者給與終止細胞棚應用管理權限2周，超出5次者停止使用其對細胞棚應用管理權限，需再次參與學習培訓后能夠再度應用。

第三章 附錄

本管理制度從發(fā)布之日起逐漸實行，由生物醫(yī)學工程精英團隊實驗棚管理委員會承擔表述及更改。本實驗棚追求完美不斷發(fā)展，諸位教師及應用工作人員若有優(yōu)良的提議可與細胞棚責任人或實驗棚管理委員會組員溝通交流，大家會立即融洽，致力于為精英團隊給予和睦，高效率的實驗標準。

細胞棚應用申請表格

序號：

申請者：		性別：		職位：老師/學員			技術職稱/班級：
老師：		聯(lián)系方式：				Email：
實驗 內容	□原代培養(yǎng) □ 傳代培養(yǎng)培養(yǎng) □ 正常體細胞培養(yǎng) □惡性腫瘤細胞培養(yǎng) □干細胞培養(yǎng) 復制培養(yǎng) □細胞毒性實驗 □細胞結合 □細胞轉染 □別的＿＿＿＿＿＿＿＿
應用時 間	年  月 日 ―  年   月 日		出 入 頻 率		□每天一次   □每日2次 □一周兩次   □一周三次
學習培訓安 排	□  必須     □  不用		申 請 培 訓 時 間		年  月    日 ―             年   月 日
申請者簽名	自己服務承諾：將嚴格執(zhí)行細胞棚管理方法管理制度，聽從管理方法；若有違背，愿接納有關懲罰。 簽字：                                     年   月    日
老師意 見及學習培訓后確定	（請對學員能不能申請辦理學習培訓給予確定） 簽名： 年    月   日			（請服務承諾對大學生應用細胞棚全過程中的標準實際操作給予催促） 簽名： 年    月   日
培訓老師建議	（請對學員能不能做到標準應用細胞棚給予點評） 簽名：                                     年    月   日
細胞棚責任人意 見	（如允許應用，請?zhí)詈脤κ褂萌说囊?guī)定與義務；如不同意應用，請注明實際原因。） 簽名：                                          年     月    日
備注名稱

注：此表一式3份，細胞實驗棚責任人一份，老師和自己一份，實驗棚聯(lián)合會歸檔一份。